分光熒光光度計(jì)測(cè)試時(shí)有哪些注意事項(xiàng)?
分光熒光光度計(jì)是一種測(cè)量熒光光譜的儀器。目前已經(jīng)廣泛應(yīng)用于各行各業(yè),特別是醫(yī)學(xué)領(lǐng)域。由于分光熒光光度計(jì)使用方法簡(jiǎn)單,測(cè)量結(jié)果準(zhǔn)確,所以更受市場(chǎng)歡迎。但是使用分光熒光光度計(jì)時(shí)一定要注意方式方法,否則會(huì)造成測(cè)量數(shù)據(jù)不準(zhǔn)確,影響實(shí)驗(yàn)效果。以下是詳細(xì)的注意事項(xiàng):
?、贅悠窇?yīng)盛在四面透光的石英比色皿(熒光池)中,如果是揮發(fā)性樣品應(yīng)使用帶塞的熒光池。
?、谠谑褂梅止鉄晒夤舛扔?jì)熒光分析時(shí),為了得到穩(wěn)定可靠的數(shù)據(jù),一般需要開(kāi)機(jī)預(yù)熱氙燈大約30min。如果儀器光源采用的是閃爍氙燈,預(yù)熱時(shí)間可以縮短到10min左右。對(duì)某些易感光、易分解的熒光物質(zhì),可以降低人射光強(qiáng)度或縮短光照時(shí)間。
③溫度變化可引起分光熒光光度計(jì)熒光強(qiáng)度的改變。通常降低溫度,有利于提高熒光量子產(chǎn)率,熒光強(qiáng)度增大。溫度影響熒光強(qiáng)度的顯著程度因樣品而異,大部分熒光物質(zhì)的熒光強(qiáng)度受溫度影響不大,測(cè)試溫度變化不超過(guò)±3℃,對(duì)測(cè)試結(jié)果幾乎無(wú)影響。
?、墚?dāng)分光熒光光度計(jì)的熒光物質(zhì)是弱酸或弱堿時(shí),溶液的pH對(duì)熒光強(qiáng)度有較大影響。因?yàn)槿跛峄蛉鯄A在不同酸度中,分子和離子的電離平衡會(huì)發(fā)生改變,而熒光物質(zhì)的熒光強(qiáng)度會(huì)因其離解狀態(tài)發(fā)生改變。
?、莘止鉄晒夤舛扔?jì)的熒光物質(zhì)分子與溶液中其它物質(zhì)分子之間作用導(dǎo)致熒光強(qiáng)度降低,常見(jiàn)的熒光猝滅劑,如鹵素離子、氧氣重金屬離子、硝基化物質(zhì)、重氮化合物等。溶液中的溶解氧也能引起幾乎所有的熒光物質(zhì)產(chǎn)生不同程度的熒光熄滅現(xiàn)象,因此,在較嚴(yán)格的熒光實(shí)驗(yàn)中必須除氧。